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【摘 要】本研究报道了猪源性胆囊收缩素39肽（cholecystokinin39，CCK39）和猪肠道大肠菌群脲酶B亚基（UreaseB，UreB）融合的原核表达载体的构建，以及兼有CCK39和UreB功能活性域的融合蛋白的表达。利用RT-PCR从猪十二指肠总RNA中克隆CCK39，再通过PCR从猪肠道产脲酶大肠菌群质粒中克隆UreB，之后将扩增所得的两基因先后定向插入原核表达载体pET43a（＋）中，构建双基因融合表达载体pET43a（＋）／CCK39／UreB，并转化至大肠杆菌（Escherichia coli）BL-21（DE3）中。重组质粒pET43a（＋）／CCK39／UreB经PCR、双酶切鉴定和序列分析，证实已成功构建双基因融合表达载体。重组表达菌经isopropylthio—β-D—galactoside（IPTG）诱导表达了分子量约为80kD的融合蛋白，与预期分子量相同，主要以可溶蛋白的形式存在于细胞质中；用Ni^2＋-NTA对可溶蛋白进行亲和纯化，纯度大于95％；Western blotting分析结果显示重组融合蛋白可分别为CCK8和Ure B抗血清识别，具有良好的反应原性。本研究所表达的融合蛋白为研制抗CCK／Urease双效疫苗奠定了基础。