【出 处】：

【作 者】：

【摘 要】为获得具有抗血小板聚集作用的重组人纤溶酶原（hPLG）,尝试了一种含有精-甘-天冬氨酰（RGD）三肽的hPLG K区缺失突变体（RGD-hPLG-？K）。首先,从pDNR-LIB-HPLG中克隆出HPLG-？K。然后定点突变激活环内的Pro559为Asp559,形成RGD模序。构建的pPICZαA-RGD-HPLG-？K电转化巴斯德毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达后可产生0.16 g/L培液的RGD-hPLG-？K,Ni-NTA层析后纯度可达90%以上;Western blotting证实所获RGD-hPLG-？K可与兔抗hPLG抗血清反应;其24 h尿激酶激活速率和纤溶活性与hPLG-？K无显著差别（P=0.630,n=5）;经尿激酶激活后,RGD-hPLG-？K的血小板聚集抑制率（21.8%±1.57%）显著高于hPLG-？K（3.8%±0.33%）（P=0.000,n=5）。表明成功构建、表达了一种具有抗血小板聚集活性的hPLG突变体,为研究新型多功能溶栓药物奠定了基础。