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【摘 要】旨在利用毕赤酵母分泌表达gp96-scFv抗体，纯化后得到能特异性结合gp96抗原的小分子抗体片段fscFv）。根据gp96．scFv抗体基因序列，合成gp96．scFv抗体基因序列，将gp96-scFv抗体序列克隆到毕赤酵母表达质粒pPlCZcx．A，线性化的重组表达载体电转化到毕赤酵母X33，甲醇诱导目的蛋白表达，通过亲和层析法纯化目的蛋白，并以SDS，PAGE和Westernblotting进行鉴定。通过Westernblotting、Immunofluorescence、ELISA、FACS方法对gp96-scFv抗体的生物活性进行了检测。结果成功地构建了分泌表达抗gp96蛋白scFv抗体的毕赤酵母菌，每升毕赤酵母菌培养上清经纯化可获约50mggp96．scFv抗体，所获抗体其分子量大约为15kDa，具有与gp96抗原特异性结合的活性。本研究通过毕赤酵母菌成功表达了gp96-scFv抗体，生物活性Westernblotting、Immunonuorescence、ELISA、FACS分析表明该抗体能特异性结合gp96。