【出 处】：

【作 者】： 房婷 ; 任军 ; 张金龙 ; 尹可欣 ; 杨秀旭 ; 于蕊 ; 张晓鹏 ; 于长明

【摘 要】重组F1-V融合蛋白（rF1-V）是目前在进行临床研究的鼠疫亚单位疫苗的主要成分。本研究摸索了rF1-V的可溶表达条件,并对条件进行了优化和放大,确定的中试发酵工艺为：在重组菌对数生长期中期加入50μmol/LIPTG,25℃诱导表达5h。通过硫酸铵分级沉淀、离子交换、疏水相互作用层析和凝胶过滤四步纯化,最终得到纯度为99%、回收率大于20%且各项检测指标合格的蛋白。在此基础上,将蛋白使用氢氧化铝佐剂进行吸附,在小鼠体内进行了免疫原性研究。ELISA测定两次皮下免疫后血清的抗体滴度。比较融合蛋白免疫组（rF1-V）与单一抗原免疫组（rF1、rV）以及联合抗原免疫组（rF1＋rV）之间体液免疫反应的差异。结果显示：20μgrF1-V免疫剂量组诱导的抗F1抗体滴度明显高于其他组,抗V抗体滴度与其他组相比没有显著差异。表明本工艺制备的rF1-V抗原有望作为鼠疫亚单位疫苗的主要组分。