【出 处】：

【作 者】： 柯丕余 [1] ; 黄俊 [2] ; 胡升 [3] ; 赵伟睿 [1] ; 吕常江 [1] ; 郁凯 [1] ; 雷引林 [3] ; 王进波 [3] ; 梅乐和 [1,3]

【摘 要】谷氨酸脱羧酶（Glutamate decarboxylase,GAD）是用于催化L-谷氨酸脱羧合成γ-氨基丁酸（γ-aminobutyrate,GABA）的唯一酶,提高GAD的催化活力或热稳定性,有利于GABA的高效制备和生产。以热稳定性和活性为筛选目标,通过研究短乳杆菌GAD1407三维模拟结构的拉氏图,确定不稳定氨基酸残基位点K413,采用定点突变的方法构建该位点的突变体,并测定野生型酶和突变酶的热稳定性和活力。结果表明突变酶K413A和突变酶K413I分别在热稳定性和酶活力上获得了提高,突变酶K413A在50℃的半衰期为105 min,是野生酶的2.1倍;突变酶K413I热稳定性没有明显的提高,但其酶活力却得到了有效提高,约为野生型的1.6倍。因此,通过拉氏图提供的结构信息可为利用理性设计提高GAD活性和热稳定性提供指导。