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【摘 要】为了方便细胞穿膜肽R9融合蛋白的可溶性表达及功能上的研究，构建了pSUMO（小分子泛素样修饰蛋白）-R9-EGFP（增强型绿色荧光蛋白）原核表达载体。分别纯化EGFP及R9-EGFP蛋白后，作用于HepG2，细胞经流式细胞仪及激光共聚焦检测R9细胞穿膜肽的作用效果。实验结果显示在SUMO分子伴侣的作用下，R9-EGFP融合蛋白获得可溶性表达。经流式细胞仪检测，R9细胞穿膜肽可以快速有效的携带目的蛋白进入细胞内部且呈时间、剂量依赖性，大约1．5h以后荧光强度进入平台期。共聚焦显微镜检测结果表明R9细胞穿膜肽可以有效携带EGFP进入HepG2细胞，并显示主要聚集在细胞浆内。同时体外经肝素抑制实验显示，肝素抑制R9-EGFP穿膜的效率达到50％。这些结果表明，可以利用pSUMO-R9／Ni—NTA表达纯化系统，快速、有效地表达出可溶性多聚精氨酸融合蛋白，同时R9细胞穿膜肽可以有效地携带目的蛋白进入细胞内，为进一步研究多聚精氨酸的穿膜机制提供了基础。